產品概述
我們建議使用本產品的更新版本:MethylFlash Global DNA Methylation (5-mC) ELISA Easy Kit(比色法)
MethylFlash Methylated DNA 5-mC Quantification Kit (Colorimetric)是一整套優化的緩沖液和試劑,通過特異性測量類似 ELISA 的微孔板形式的 5-甲基胞嘧啶 (5-mC) 水平,對整體 DNA 甲基化進行比色定量。與基于 LUMA 或基于 LINE-1、Alu 和 LTR 的檢測相比,MethylFlash? 技術可直接定量實際的整體 DNA 甲基化。
該試劑盒還經過專門優化,可與 MethylFlash 羥甲基化 DNA 定量試劑盒(比色法)配合使用,同時定量甲基化 DNA 和羥甲基化 DNA。
產品特點
MethylFlash? 甲基化 DNA 定量試劑盒(比色法)通過簡化工作流程和提高結果的一致性,進一步改進了我們之前的 Methylamp? 整體 DNA 甲基化定量試劑盒。它使用一種創/新方法使背景信號極低,從而消除了板的干燥和阻塞步驟。與基于色譜的方法(如 HPLC 或質譜法)相比,該產品提供了一種經濟高效的方法來準確測量 5-甲基胞嘧啶的水平。該套件具有以下優點和特點:
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比色分析具有易于遵循的步驟,方便快捷。整個過程可以在 4 小時內完成。
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創/新的試劑盒組成使背景信號極低,無需板封閉,使檢測簡單、準確、可靠且一致。
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高靈敏度,其中檢測限可低至 0.2 ng 的甲基化 DNA,可接受低至 50 ng 的起始基因組 DNA。
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優化的抗體和增強劑溶液對 5mC 具有高度特異性,在樣品 DNA 的指定濃度范圍內,與未甲基化胞嘧啶沒有交叉反應性,與羥甲基胞嘧啶沒有或可以忽略不計的交叉反應性。
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包括通用陽性和陰性對照,適用于定量任何物種的甲基化 DNA。
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聯管孔板規格使分析更加靈活:手動或高通量分析。
原理和程序
MethylFlash? 甲基化 DNA 定量試劑盒(比色法)包含了定量全球 DNA 甲基化所需的所有試劑。在該檢測中,DNA 結合到剝離經過專門處理的孔中,這些孔具有高 DNA 親和力。使用捕獲和檢測抗體檢測 DNA 的甲基化部分,然后通過在微孔板分光光度計中讀取 450 nm 處的吸光度,通過類似 ELISA 的反應進行定量。甲基化 DNA 的量與測得的 OD 強度成正比,這可以通過試劑盒中包含的兩種不同 DNA 樣品的相對甲基化狀態公式或使用標準曲線對 5-甲基胞嘧啶 (5mC) 進行**定量來計算。
簡單、快速、靈活
整個比色分析具有易于遵循的步驟,方便快捷,可在 4 小時內完成。條孔微孔板規格允許在手動或高通量分析中進行靈活的分析。該試劑盒包含通用陽性和陰性對照,用于定量來自任何物種(如哺乳動物、植物、真菌、細菌和病毒)的甲基化 DNA。
安/全方便
定量整體 DNA 甲基化所需的所有試劑,包括陰性對照和陽性對照,都方便地包裝在試劑盒中。DNA 樣品的直接比色定量取代了過時或劣質的方法,無需 DNA 消化/變性、放射性、提取或色譜分析。
高靈敏度和特異性
新穎的程序和專有的試劑盒組成能夠以高靈敏度和特異性實現甲基化 DNA 的準確定量。起始 DNA 的檢測限可低至 0.2 ng 的甲基化 DNA。
可用的基于 ELISA 的 Global DNA 甲基化檢測方法的比較
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MethylFlash(比色)
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競爭對手 Z
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競爭對手 C
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檢測原理
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直接 ELISA
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直接 ELISA
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間接 ELISA
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格式
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96 孔板
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96 孔板
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96 孔板
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敏感性
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出色的檢測限:0.2 ng 5-mC DNA
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良好的檢測限:>0.5 ng 的 5-mC DNA
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檢測限極低:>1000 ng 5 mC DNA
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信噪比
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>20,背景非常低
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<4 具有高背景
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不適用*
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程序便利性
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無需 DNA 板封閉和變性
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需要板封閉和 DNA 變性
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需要在另一塊板中進行板封閉、DNA 消化和抗體競爭性孵育
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協議時間
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<4 小時
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<4 小時
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>8 小時
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DNA 類型和種類
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適用于任何物種,包括 ssDNA 和 dsDNA
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**人和小鼠 ssDNA
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各種物種
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特 異性
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僅特定于 5 mC
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與 5-hmC 的交叉反應
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不適用*
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定量類型
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相對和**定量
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相對
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相對
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標準控制
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穩定,**量為 5 mC 即可定量,可普遍用于任何物種
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不穩定,不能定量,只能用于人或小鼠
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不適用*
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*/小輸入量
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50 ng
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100 ng
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1000 ng
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檢測準確性
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高、穩定和定量的標準品控制。經用戶驗證與 LC-MS 分析密切相關
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標準品控制不明確、不穩定且未定量
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不適用*
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% 5 mC 計算
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簡單
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復雜
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未提供
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**方法
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是的
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不
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不
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人氣
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非常高的已發表引文計數
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低發表引文計數
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低發表引文計數
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支持專業知識
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自 2006 年以來
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自 2013 年以來
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自 2011 年以來
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* 數據表提供的信息不足或產品無法提供數據以做出*/終決定